Полимеразная цепная реакция
ПЦР — новое достижение молекулярной генетики, используется для амплификации ДНК и позволяет быстро размножить in vitro специфический
участок ДНК (то есть любой интересующий ген) более чем в 200 000 раз. Чтобы провести реакцию, достаточно иметь ДНК-материал одной клетки; количество амплифицированной с помощью ПЦР ДНК столь велико, что эту ДНК можно просто окрашивать (использование радиоактивных зондов после электрофореза не требуется). Необходимое условие для проведения ПЦР — знание нуклеотидной последовательности амплифицируемой области ДНК для правильного подбора искусственно синтезированных прай-меров.
В настоящее время ПЦР представляет собой процесс, протекающий в одной пробирке и состоящий из повторных циклов амплификации (размножения, копирования) специфической последовательности молекулы ДНК с целью получения достаточно большого количества копий, которые могут быть идентифицированы методом электрофореза. Один из ключевых компонентов реакции — «праймеры» — синтетические олигонуклеоти-ды, состоящие из 20-30 оснований, комплементарных «сайтам» (участкам) отжига (присоединения) на идентифицируемом участке матричной ДНК.
ПЦР протекает автоматически в программируемом термостате — термо-циклере (амплификаторе). Трёхступенчатый цикл, в результате которого получаются точные копии идентифицируемого участка матричной ДНК, повторяют 30-50 раз в соответствии с заданной программой термоцикле-ра. В первом цикле олигопраймеры гибридизуются с исходной матричной ДНК, а затем (в последующих циклах) и с вновь синтезированными молекулами ДНК по мере их накопления в реакционной смеси. В последнем случае синтез ДНК заканчивается не вследствие изменения температурного режима, а по достижении ДНК-полимеразной границы амплифициро-ванного участка, что и определяет размер вновь синтезированного участка ДНК с точностью до одного нуклеотида.
В качестве метода детекции полученных молекул ДНК используют электрофорез, с помощью которого производится разделение амплифи-цированного материала по размеру ампликонов (продуктов амплификации).
С помощью ПЦР можно непосредственно исследовать места локализации предполагаемых мутаций или полиморфных сайтов, а также изучать наличие любых других специфических особенностей ДНК.
- Показания: настой из цветков бузины используют для лечения хронических заболеваний верхних дыхательных путей, сопровождающихся кашлем, при простудных заболеваниях
- Показания: настой корзинок пижмы используют для лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, гастритах с повышенной секреторной функцией и
- Пчелиное маточное молочко — секрет аллотрофических желез рабочих пчел, вырабатываемый для питания личинок, обеспечивающий их быстрый рост и развитие
- Все методы, используемые для искоренения аномалий рефракции, представляют собой лишь различные способы достижения расслабления. Большинство людей самым легким
- Мочевая терапия не является чем-то новым. Это не фантазия мошенника и не мистификация. Наоборот, это проверенный временем метод
- Важную и ответственную роль доверила природа женщинам — роль матери. Для этого она наделила женщин нежностью и заботливостью, терпением